日立高速冷冻离心机如何去培养管分离细胞膜
日立仪器出产的高速冷冻离心机特别配置了新型的专用于组织培养管的高速转头，并专门定制了高强度的50ml 锥底管。用这种转头分离细胞器，离心时间短，分离效果好。
设备：高速冷冻离心机，6×50ml高速转头， 50 ml 离心管
操作步骤：
1．成年鼠肝匀浆2000xg（约4000rpm） 离心15分，4℃（6×50ml高速转头）
2．沉淀用1mM NaHCO3 稀释再在4000rpm离心15分，4℃
3．沉淀按湿重1g/ml NaHCO3 稀释后配成68％蔗糖液，置于离心管下部，上部用42％蔗糖液
4．6×50ml高速转头，42200xg（18000rpm），4℃离心90分钟，加速“5”减速“5”
5．离心后，粗制细胞膜在42％与68％蔗糖液之间形成
6．粗制细胞膜吸出后，用1mM NaHCO3 稀释后，再以2000xg（约4000rpm）4℃离心30分，重复二次
7．去除上清液沉淀，再用1mM NaHCO3 稀释，在50ml 离心管中，从底部依次向上铺设：68％蔗糖液（稀释样品配成）、48％蔗糖液、42％蔗糖液。
8．铺好后再次离心，6×50ml高速转头，18000rpm，4℃，90分钟，加速“5”减速“5”
9．离心结束后可以看出细胞膜分布在42％与48％蔗糖液之间
成果：阶梯形蔗糖梯度在50ml 离心管中用高速冷冻离心机分离亚细胞构造（膜、线粒体、溶酶体、高尔基复合体、微体等），由于开发了高强度的组培养管而变得更为可行。
通过上例，我们可以选择不同的蔗糖阶梯度来分离细胞器，可以得到相当高的纯度。除了蔗糖梯度以外，用Percoll及Nycodenz 的自形成、予形成或阶梯梯度分离亚细胞构造，近年来被广泛应用。
如有任何问题请咨询日立离心事业部：4008-525-990
相关新闻
-
日立超速离心机外泌体分离方法大PK，···
近年来，Science、Nature、JEV 等各大期刊上高频出现的方向之一，正是外泌体。 外泌体是什么？ 外泌体（exosome）是由细胞内多泡体与细胞膜融合后，释放到细胞外基质中的纳米级囊泡。
-
Hitachi超速离心机售后维修,如···
Hitachi离心安全 | 如何预防离心管破碎 破碎可能带来的损失可大可小，小到“只”需重新制样，大到所有试验重新来过，相信两种结果都不是大家希望的。 而且样品泄露后，如果离心
-
日立离心机明星型号盘点：生物实验室的···
日立离心机在生物实验室中的核心地位，源于其对样本完整性、分离效率和操作安全的极致考量。无论是常规的细胞沉淀、蛋白纯化，还是高要求的病毒富集、亚细胞器分离，乃至精密的核酸提取，日立都有相应的型号能满足不同通量、不同速度和不同容量的需求。其智能化的控制系统、广泛的转子兼容性以及可靠的温控能力，为复杂的生物学实验提供了坚实保障。
